本书是一部关于分子生物学的实验教材,全书介绍了现代分子生物学基本的、综合性的和一些*新的实验方法和技术,在此基础上为训练学生的综合素质和独立从事实验的能力,增加了探索性实验。

基 础 篇

实验1 碱法提取质粒

实验2 煮沸法提取质粒

实验3 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验4 质粒的限制性内切酶反应分 析

实验5 用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA

实验6 DNA的连接

实验7 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化

实验8 植 物总RNA的提取

实验9 聚合酶链反应——PCR

实验10 CDNA末端快速扩增——RACE

实验11 高通量基因克隆技术

实验12 银染法DNA序列测定

应 用 篇

实验13 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化

实验14 蛋白质的SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验 15 昆虫细胞中外源基因的表达

实验16 蛋白质的Weatern印迹分析

实验17 土壤农杆菌介导的烟草基因转化

实验18 应用微弹轰击法进行兰 花基因转化

.实验19 植物总DNA的提取

实验20 DNA探针的制备

实验21 DNA的Southern印迹分析(用同位素标记探针)

实验22 DNA的Southern印迹分析(用Dig标记探针)

实验23 mRNA的Northern印迹分析(用Dig标记探针)

实验24 酵母双杂系统 研究蛋白质的相互作用

实验25 CytoTrap酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用

实验26 DNA一蛋白质的相互作用

实验27 蛋白质核酸结合活 性的分析

实验28 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能

实验29 水稻突变体库的创建

实验30 转基因水稻突变体T—DNA侧翼序列 的扩增与分析

探 索 篇

实验31 亚克隆及检测的独立设计与操作

实验32 土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化

实验33 不同植物材料 组织的再生培养

实验34 在酵母细胞中表达外源基因

实验35 应用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白

实验36 检测蛋白质 的相互作用——Protein Overlay

实验37 沉默转G.US基因烟草中的GUS基因

实验38 拟南芥T—DNA突变库的构建

实验39 用RNAi的方法研究拟南芥基因功能

主要参考资料