《普通生物化学教程实验指导》(以下简称《实验指导》)是与蒋立科、高继国等人所编《普通生物化学教程》而配套的实验指导教材,全书以生物体的初生物质和次生物质的提取、纯化、鉴定为线索,引导读者认识到生物体内组成成分不应仅局限于糖类、脂类、蛋白质和核酸“四大类”物质,还应关注生物体为适应逆境下生存而产生的次生物质,即凡是由生物体所产生的物质均属于“生物分子”的范畴。本《实验指导》设绪论、实验及附录三大部分,精选50个实验,分糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素、生物氧化等几个方向。
本书突出实验与教材知识的一致性,是为消化和巩固在课堂中所学习知识服务的,不仅体例、取材新颖,而且选取的实验经过反复实践,可操作性好,既可作为各类院校生物等专业的本科教材,也可作为生物化学教学和研究人员的参考书。

**章 糖的化学
实验一 还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法
一、 目的
掌握还原糖和总糖测定的基本原理,进一步熟练比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。
二、原理
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540hm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
……

绪论
**节 做好生化实验的“字令”
第二节 学会当好“小先生”
第三节 实验室规则
第四节 实验记录与实验报告
**章 糖的化学
实验一 还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法
实验二 还原糖含量测定——砷钼酸比色法
实验三 可溶性总糖测定——蒽酮比色法
实验四 可溶性糖的分离提取与薄层层析鉴定
实验五 真菌多糖的提取与鉴定
实验六 牛眼透明质酸的分离及含量测定
第二章 脂类化学
实验七 脂肪碘值的测定
实验八 油脂酸价的测定
实验九 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法
实验十 豆磷脂的制备与鉴定
第三章 蛋白质化学
实验十一 氨基酸纤维素薄层层析
实验十二 胰岛素N-末端氨基酸DNS分析法
实验十三 总氮含量的测定
实验十四 脯氨酸含量的测定
实验十五 茚三酮显色法测定氨基酸含量
实验十六 赖氨酸含量测定——茚三酮显色法
实验十七 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量
实验十八 Folin-酚法测定蛋白质含量
实验十九 紫外吸收法测定蛋白质含量
实验二十 蛋白质分子量测定——SDS-PAGE法
实验二十一 凝胶层析法测定蛋白质的分子量
实验二十二 牛乳中酪蛋白的提取与检测
第四章 核酸化学
实验二十三 酵母RNA的提制——浓盐法
实验二十四 酵母RNA与DNA的提取(稀碱法)及颜色反应
实验二十五 地衣酚显色法测定RNA含量
实验二十六 三种腺苷酸分离鉴定——醋酸纤维素薄膜电泳法
实验二十七 紫外吸收法测定核酸的含量
实验二十八 植物DNA的提取与测定
实验二十九 总RNA提取与mRNA分离
实验三十 质粒DNA的提取、酶切与鉴定
实验三十一 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验三十二 多聚酶链式反应(PCR)
第五章 酶
实验三十三 淀粉酶活力的测定
实验三十四 淀粉酶酶学性质研究
实验三十五 植物组织中蔗糖酶活力的测定
实验三十六 硝酸还原酶活性的测定
实验三十七 蛋清溶菌酶的提取及活性测定
实验三十八 谷氨酸丙酮酸转氨酶活性测定
实验三十九 纤维素酶活力的测定
实验四十 过氧化物酶活性的测定
实验四十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶
实验四十二 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定——邻苯三酚法
实验四十三 玉米超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化、活力测定及电泳鉴定
第六章 维生素
实验四十四 维生素A的含量测定
实验四十五 维生素B1含量测定
实验四十六 维生素C的含量测定——滴定法
实验四十七 维生素C的含量测定——比色法
第七章 生物氧化
实验四十八 细胞色素体系的作用及其**
实验四十九 琥珀酸脱氢酶的竞争性**实验
实验五十过 氧化氢酶的酶活性测定
附录
附录一 玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制
附录二 实验室常用仪器的使用
附录三 试剂的配制与保存
附录四 常见蛋白质、核酸等的相关参数
附录五 层析法有关数据表
参考文献