本书是《色谱技术丛书》中专门介绍亲和色谱方法的分册。书中对亲和色谱方法的特点、适用范围、亲和固定相的制备方法及实验技术作了较全面的介绍。由载体、间隔臂和配位体制作的亲和固定相可与生物分子生成具有“锁匙”结构的络合物，其在生物化学、分子生物学和生物工程下游技术中获得广泛的应用。
本书适用于生物化学、分子生物学、药学、分析化学等专业师生选作教材或参考书，也可供从事制备液相色谱、生物制品或天然产物纯化、传感器制作、微流路芯片或生物芯片制作的工程技术人员作为学习参考材料。

亲和色谱是液相色谱的一个分支，主要用于生物分子的分离、纯化和分析。
亲和色谱主要依据生成具有“锁匙”结构特征的络合物，利用分子识别的特异功能，来实现生物分子的**性分离。本书试图对亲和色谱近50年的发展概况进行扼要的介绍，全书共分13章。
**章亲和色谱法基础，介绍了亲和色谱方法的特点、亲和色谱的发展史和基本理论；**阐述锁匙络合物的化学平衡、亲和吸附等温线和吸附与解吸的动力学、质量平衡的数学模型。
第二章流动相，对亲和色谱中流动相的组成，Good’s缓冲物和洗脱方法做了较详细的介绍。
第三章和第四章对应固定相（一）和固定相（二），对构成亲和固定相的载体的组成、活化方法；间隔臂的构成及偶联方法；配位体的类型、键合容量及键合方式做了全面的介绍。
第五、第六、第七章对应生物**配位体（一）、生物**配位体（二）和生物**配位体（三），**介绍了生物**配位体涉及的核酸、蛋白质、酶、维生素、辅酶、外源凝集素、糖、抗体和抗原、亲和素生物素、激素��生物细胞、生物分子组合体和微生物等多种类型、性能各异的高**性配位体。
第八章染料配位体，其作为具有组**性的*重要的生物模拟配位体。
第九章定位金属离子配位体，其为另一类重要的生物模拟配位体。第十章包合配合物配位体，为近年迅速发展的、对手性生物分子具有**的分离能力，如βCD、冠醚、穴醚及杯芳烃。
第十一章电荷转移配位体，介绍了电子给予配位体、电子接受配位体和卟啉、酞菁衍生物配位体。
第十二章介绍了共价、分子印迹、疏水作用三类亲和配位体。
第十三章介绍了亲和色谱法的实验技术、方法进展及发展前景。本书在固定相和配位体各章、节，较详细地介绍了载体活化、间隔臂偶联，配位体键合制备亲和固定相的具体操作方法、化学反应的基本过程、分析测定实例、重要的参考文献，以便于读者阅读借鉴。
为了同步反映液相色谱柱制备技术的快速发展，全书对多糖凝胶经典填充柱；SiO2和P（SDVB）等聚合物微粒**填充柱；配位体涂渍或表面薄层键合柱；由甲基丙烯酸酯共聚物或聚丙烯酰胺制作的整体填充柱和整体毛细管柱；开管毛细管微柱；微流路芯片制作等都做了较全面的介绍。
本书是在作者承担两项**自然科学基金项目和参与一项北京市自然科学基金项目的科研工作基础上，通过阅读大量参考文献，和大量本科生、研究生参与科研实践，才完成本书的编写工作，在此向参与上述科研工作的本科生和研究生致以诚挚的感谢。
本书完稿过程中责任编辑对章、节的分割提出中肯的意见，并做了大量编辑工作，特此致谢。
*后感谢本丛书主编傅若农教授的耐心审阅和提出的宝贵修改意见，特此致谢。鉴于作者水平，对本书不妥之处，欢迎读者指教。
于世林2007年9月
于北京化工大学

**章亲和色谱法基础1
**节概述1
一、锁匙结构络合物的形成1
二、亲和色谱和液相色谱2
三、**液相亲和色谱3
四、亲和色谱方法的分类4
五、亲和色谱发展史4
第二节亲和色谱法的基本理论7
一、锁匙结构亲和吸附络合物的化学平衡8
二、亲和吸附等温线、吸附速度和吸附动力学方程式11
三、亲和键合动力学14
四、亲和色谱的质量平衡数学模型15
五、“分裂峰”效应的研究19
参考文献23

第二章流动相25
**节影响亲和色谱洗脱的各种因素25
一、锁匙络合物的离解常数25
二、配位体的浓度26
三、空间阻碍作用27
四、亲和固定相的吸附容量28
五、平衡时间29
六、温度效应30
第二节缓冲溶液流动相的组成30
一、常用的酸、碱缓冲溶液30
二、用于生物化学研究的氢离子缓冲物32
第三节洗脱方法41
一、非选择性洗脱法41
二、**性洗脱法（或称生物选择性洗脱法）42
三、特殊洗脱方法43
参考文献44

第三章固定相（一）45
**节亲和色谱固定相的制备方法45
一、亲和色谱固定相的组成45
二、固定化反应及其特点46
三、在固定化反应中使用的分析技术46
第二节载体材料的分类及特性49
一、描述载体材料的基本特性参数50
二、无机氧化物载体材料51
三、聚合物载体材料54
四、无机氧化物、聚合物载体的性能比较61
五、复合物载体材料63
六、磁性载体材料66
参考文献67

第四章固定相（二）70
**节载体材料的活化70
一、无机氧化物的偶联反应70
二、天然有机高聚物的活化反应75
三、合成有机聚合物的功能化反应81
第二节间隔臂86
一、间隔臂在亲和色谱固定相中的特殊作用86
二、疏水性直链型间隔臂91
三、亲水性直链型间隔臂94
四、星形辐射树枝状间隔臂95
第三节配位体97
一、配位体的类型97
二、配位体的键合量99
三、配位体的键合方式100
参考文献102

第五章生物**配位体（一）104
**节核碱、核苷、核苷酸、寡聚核苷酸、核酸（RNA、DNA）104
一、核碱104
二、核苷108
三、核苷酸108
四、寡聚核苷酸、核酸及其碎片111
第二节氨基酸、肽、酶和蛋白质121
一、氨基酸121
二、肽123
三、酶和蛋白质127
参考文献138

第六章生物**配位体（二）140
**节维生素及辅酶140
第二节外源凝集素144
一、豆类外源凝集素琼脂糖，SiO2亲和固定相145
二、蓖麻凝集素琼脂糖亲和固定相146
三、三重外源凝集素琼脂糖亲和固定相147
四、在微流路芯片上豌豆凝集素（PSA）P（GMAEDMA）共聚物整体亲和
柱的制备149
第三节糖类150
一、肝素琼脂糖，SiO2亲和固定相150
二、甘露聚糖P（GMAEDMA）共聚物整体毛细管亲和柱的制备151
第四节抗原和抗体153
一、抗原及其性质153
二、抗体及其性质154
三、抗体与抗原相互作用的特点155
四、免疫亲和色谱固定相的制备156
参考文献162

第七章生物**配位体（三）165
**节亲和素生物素165
一、亲和素和链亲和素的重要性质165
二、亲和素生物素技术166
三、生物素酰化衍生物（或结合体）的生成167
四、亲和素固相载体共轭探针的形成167
五、亲和素生物素技术在亲和色谱的应用170
第二节激素175
一、胰岛素琼脂糖亲和固定相175
二、促肾上腺皮质激素琼脂糖亲和固定相177
三、雌二醇琼脂糖亲和固定相177
四、皮质醇琼脂糖亲和固定相178
第三节生物细胞、生物分子组合体和微生物178
一、生物细胞和生物分子组合体179
二、微生物细胞181
参考文献182

第八章染料配位体184
**节三嗪活性染料的性质184
一、三嗪染料的组成184
二、三嗪染料对生物分子的**亲和作用186
第二节染料配位亲和固定相的制备及分析应用187
一、多糖基体亲和固定相187
二、全多孔（或非多孔）硅胶基体亲和固定相192
三、聚合物基体亲和固定相195
四、 Cibacron Blue F3GA开管毛细管亲和柱202
参考文献202

第九章定位金属离子配位体204
**节概述204
一、定位金属离子的特性204
二、螯合官能团或螯合剂的特性205
三、蛋白质的吸附和解吸206
四、IMAC方法的特点207
第二节IMAC固定相的制备方法及在生物分子分离、纯化中的应用207
一、亚氨基二乙酸（IDA）207
二、次氨基三乙酸（氨三乙酸，NTA）221
三、亚氨基二乙醛肟（IDAO）221
四、乙二胺（ED）222
五、三（羧甲基）乙二胺（TED）223
六、乙二胺N，N′二乙酸（EDDA）224
七、丙二胺四乙酸（PDTA）225
八、 8羟基喹啉225
参考文献228
第十章包合配合物配位体230
**节β环糊精230
一、 β环糊精的特性230
二、βCD包合固定相的制备及在生物分子分离、纯化中的应用232
第二节冠醚和穴醚242
一、冠醚和穴醚的特性242
二、冠醚包合固定相的制备243
第三节杯芳烃245
一、杯芳烃的特性246
二、杯芳烃包合固定相的制备247
参考文献252

第十一章电荷转移配位体254
**节电子给予接受络合物254
一、电子给予接受络合物的特性254
二、芳烃、多环芳烃配位体电荷转移亲和固定相255
第二节电子给予配位体电荷转移固定相256
一、苯基烯丙基醚硅胶电荷转移固定相256
二、2氯喹唑啉（CQZ）硅胶电荷转移固定相256
三、8羟基喹啉（8HQ）硅胶电荷转移固定相256
四、吖啶黄素葡聚糖电荷转移固定相258
第三节电子接受配位体电荷转移固定相258
一、二硝基苯（DNP）葡聚糖（硅胶）电荷转移固定相258
二、五氯巯基酚（PCP）葡聚糖电荷转移固定相260
三、 4氨基1，8萘二甲酰亚胺（ANA）葡聚糖电荷转移固定相260
四、 2，3二氰基5，6二氯代苯醌（DCBQ）葡聚糖电荷转移固定相261
五、四氯邻苯二甲酰亚胺（TCPI）硅胶电荷转移固定相261
六、二硝基苯甘氨酸（DNPGly）P（SDVB）或PMA电荷转移固定相261
第四节卟啉配位体电荷转移固定相263
一、卟啉及其衍生物263
二、卟啉电荷转移固定相的制备及分析应用264
第五节酞菁配位体电荷转移固定相271
一、酞菁及其衍生物271
二、四磺酸化铜酞菁硅胶固定相272
三、其他金属离子酞菁衍生物的应用274
参考文献275

第十二章共价、分子印迹和疏水作用配位体277
**节共价配位体277
一、常用的共价配位体277
二、共价配位体亲和固定相的制备277
第二节分子印迹（模板）配位体285
一、分子印迹聚合物的特性285
二、共价键合分子印迹聚合物287
三、非共价键合分子印迹聚合物289
四、苯丙氨酰苯胺P［AA（或MAA）EDMA］共聚物分子印迹整体柱292
五、表面涂渍分子印迹聚合物的固定相293
第三节疏水作用配位体298
一、疏水作用原理298
二、疏水作用亲和固定相的制备302
参考文献305

第十三章亲和色谱法实验技术及其进展307
**节亲和色谱法实验技术307
一、亲和色谱固定相的制备技术307
二、亲和色谱分析操作技术309
三、生物样品的保存和制备313
第二节亲和色谱方法的进展314
一、亲和色谱分离材料的设计315
二、新型高选择性**的研制319
三、亲和色谱的发展前景320
参考文献323

附录325
Ⅰ活化和偶联配位体到HPLAC载体的反应条件325
Ⅱ亲和色谱固定相制备中常用的偶联剂、活化剂327
……