第1章绪论/001 1.1降解石油烃产甲烷的研究背景002 1.2降解石油烃产甲烷的目的和意义003 1.3降解石油烃产甲烷的国内外研究进展005 1.3.1降解石油烃产甲烷的功能菌群008 1.3.2影响微生物厌氧降解产甲烷的条件018 1.3.3石油降解的副产物019 1.3.4石油烃厌氧代谢机理019 1.3.5降解石油烃产甲烷的微生物分析方法021 1.4主要研究内容及技术路线022 1.4.1主要研究内容022 1.4.2主要技术路线023 参考文献024 第2章降解石油烃产甲烷菌群的初筛/038 2.1主要仪器和试剂043 2.1.1主要仪器043 2.1.2主要试剂043 2.2实验设计和方法045 2.2.1实验设计045 2.2.2实验方法048 2.3实验结果与讨论054 2.3.1采出液理化性质分析054 2.3.2YH5和TH2菌群的初筛055 2.3.3产甲烷前后石油烃的变化060 2.3.4YH5和TH2菌群结构的分析064 2.4本章小结070 参考文献071 第3章**产甲烷菌群的建立/079 3.1主要仪器和试剂085 3.1.1主要仪器085 3.1.2主要试剂086 3.2实验设计和方法087 3.2.1实验设计087 3.2.2实验方法089 3.3实验��果与讨论090 3.3.1温度和压力的模拟系统气密性和**性分析090 3.3.2YH5和TH2的配比分析及HYH5的建立092 3.3.3产甲烷菌群HYH5降解石油的分析095 3.3.4温度和压力对HYH5降解石油烃产甲烷的影响100 3.4本章小结104 参考文献106 第4章混合菌中单菌鉴定及混合菌培养条件的优化/111 4.1主要仪器和试剂112 4.1.1主要仪器112 4.1.2主要试剂112 4.2实验设计和方法112 4.2.1实验设计112 4.2.2实验方法114 4.3实验结果与讨论117 4.3.1HYH5和YHH6混合菌群中单菌的分离鉴定117 4.3.2接种量对HYH5菌群的影响126 4.3.3初始pH值对HYH5菌群的影响126 4.3.4初始盐度对HYH5菌群的影响127 4.3.5石油浓度对HYH5菌群的影响127 4.3.6采油剂聚丙烯酰胺对HYH5菌群的影响128 4.4本章小结129 参考文献131 第5章生长激活剂对菌群产甲烷的影响/133 5.1主要仪器和试剂134 5.1.1主要仪器134 5.1.2主要试剂134 5.2实验设计和方法135 5.2.1不同表面活性剂对HYH5混合菌群产甲烷的影响135 5.2.2不同碳源对HYH5菌群产甲烷的影响135 5.2.3钼离子和锌离子对HYH5菌群产甲烷的影响136 5.2.4硫酸根和硝酸根电子受体对HYH5菌群产甲烷的影响136 5.2.5YHH6副产物对HYH5菌群产甲烷影响137 5.3实验结果与讨论138 5.3.1不同表面活性剂对HYH5混合菌群产甲烷的影响138 5.3.2不同碳源对HYH5菌群产甲烷的影响139 5.3.3钼离子和锌离子对HYH5菌群产甲烷的影响140 5.3.4硫酸根和硝酸根电子受体对HYH5菌群产甲烷的影响140 5.3.5红外光谱和**液相色谱分析YHH6副产物142 5.3.6YHH6副产物对HYH5菌群产甲烷的影响143 5.4HYH5厌氧产甲烷菌群的应用144 5.5本章小结145 参考文献146 第6章降解石油烃产甲烷的机理初探/149 6.1主要仪器和试剂151 6.1.1主要仪器151 6.1.2主要试剂151 6.2实验设计和方法151 6.2.1实验设计151 6.2.2实验方法152 6.3实验结果与讨论153 6.3.1HYH5菌群降解同位素标记的甲苯153 6.3.2HYH5菌群降解链烃的分析157 6.4本章小结158 参考文献158 第7章结论及展望/160 7.1结论161 7.2展望162 附录/164 附录1:紫外分光光度法测定采出水中总氮165 附录2:DNA提取仪器设备168 附录3:DNA提取步骤168 附录4:DGGE标准操作方法169 附录5:降解菌的生理生化特性实验170 附录6:细菌基因组DNA提取试剂盒使用方法172 附录7:基因组DNA及PCR产物琼脂糖电泳174 附录8:原油四组分分离方法175