本书的出发点旨在使读者不仅懂得怎样对已获成果进行孵化,而且能将其推上市场。体现对读者先进行内功操练,使其达到既能掌握从原材料筛选、分离提取、纯化精制的技术,又懂得如何克服产品进入市场的风险(如经营、产品销售等),真正能成为不但有理论修养,而且懂专业,还能通过实践逐步成为拥有开拓市场能力的人才。通过本书的学习和实践,也可使读者掌握在保持目标产物高活性、高纯度、高收率情况下,系统提取工程的概念,为进一步生物科学研究和开发应用训练技能奠定基础。
全书设绪论、基础性实验(内设21个实验,有的实验中还设若干平行实验供选择)、探索性试验(4个)和课程实践(2个)四部分。
本书适合生物化学工程、生物技术、生物制药、食品科学、生物工程和农林科技等相关专业使用,也适合上述专业对毕业实习指导的需要。

实验八 刀豆脲酶的分离纯化及动力学研究
**部分 脲酶的分离与纯化
一、实验目的
学习并熟悉从刀豆中分离纯化脲酶,并对其进行动力学研究,巩固从生化中所学到的关于酶的纯化及动力学基本理论。
二、实验原理
离子交换层析是在以离子交换剂为固定相,以液体为流动相的系统中进行的。此法广泛应用于很多生化物质(例如,氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、核苷和有机酸等)的分析、制备、纯化,以及溶液的中和、脱色等方面。
离子交换层析之所以能成功地把各种无机离子、有机离子或生物大分子物质分开,其主要依据是离子交换剂对各种离子或离子化合物有不同的结合力。
凝��层析法也称分子筛层析法,是指混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品收率高,除常用于分离纯化蛋白质、核酸、多糖、激素等物质外,还可用于测定蛋白质的相对分子质量,以及高分子物质样品的脱盐和浓缩等。由于整个层析过程中一般不变换洗脱液,有如过滤一样,故又称凝胶过滤。
凝胶是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构、呈珠状颗粒的物质,每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致,像筛子。直径大于孔径的分子不能进入凝胶内部,便直接沿凝胶颗粒的间隙流出,所以向下移动的速率较快;小分子物质除了可以在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相中,因此在向下移动的过程中,必须等待它们从凝胶颗粒内扩散至颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,造成在柱内保留时间长。所以小分子物质的下移速率必然落后于大分子物质,从而使混合样品中分子大小不同的物质随洗脱液按顺序地流出柱外而得到分离。具有这种效应的物质很多,其中效果较好的有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶等。
……

前言
绪论
**篇 基础性实验
实验一 转氨基作用定性鉴定及氨基酸纸层析
实验二 胰岛素N末端氨基酸DNS分析法
实验三 金针菇子实体多糖PA5DE的提取
**部分 多糖的提取与纯化
第二部分 多糖组分的鉴定
实验四 豆腐柴的综合开发利用——叶豆腐的制作及其果胶的提取
实验五 总RNA提取与mRNA分离
实验六 硫酸软骨素提取工艺的研究
**部分 硫酸软骨素的提取纯化工艺
第二部分 硫酸软骨素的检测
实验七 姜黄素的提取与实验应用
实验八 刀豆脲酶的分离纯化及动力学研究
**部分 脲酶的分离与纯化
第二部分 脲酶纯度的鉴定
第三部分 刀豆脲酶活性测定
第四部分 蛋白质浓度测定
第五部分 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质亚基的相对分子质量
第六部分 刀豆脲酶的动力学研究
实验九 胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)的制备
实验十 纤维素酶活力检测
实验十一 蛋清溶菌酶的提取及活性测定
**部分 蛋壳蛋清的预处理
第二部分蛋清溶菌酶的精制
第三部分 蛋清溶菌酶活性的测定
实验十二 柑橘皮果胶的提取工艺
**部分 柑橘皮果胶的提取过程
第二部分 果胶产品合格率的检测
实验十三 牛眼透明质酸的分离及含量测定
实验十四 可溶性糖分离提取与薄层层析鉴定
实验十五 植酸钙的精制工艺
实验十六 真菌多糖的提取与鉴定
实验十七 牛乳中酪蛋白、乳蛋白素和乳糖的提取与检测
实验十八 辣椒红色素的制备和检测
实验十九 银杏叶黄酮的提取与分离
实验二十 亮菌素的生物合成、分离与鉴定
**部分 菌物的培养与接种
第二部分 菌物的提取
第三部分 菌物的检测
实验二十一 竹笋过氧化物酶的提取及活性测定
**部分 竹笋过氧化物酶的初步提取
第二部分 竹笋过氧化物酶精制
第三部分 竹笋过氧化物酶活性的测定
第二篇 创新探索性实验
实验二十二 石斛生物碱的提取分离与检测
实验二十三 啤酒酵母蔗糖酶的部分分离纯化和理化特性的监测
**部分 啤酒酵母蔗糖酶的分离纯化
第二部分 圆盘电泳检测纯度
第三部分 酶活力、蛋白质浓度测定
第四部分 酶促动力学
第五部分 pH对酶活性的影响
第六部分 酶的*适温度
第七部分 分子筛层析测酶相对分子质量
第八部分 蔗糖酶的SDS-PAGE
实验二十四 复合酶中辅酶的测定
**部分 辅酶Ⅰ的测定——醇脱氢酶法
第二部分 辅酶Ⅱ的测定——葡萄糖-6-磷酸脱氢酶法
第三部分 辅酶A的测定——乙酰化酶-磺胺法
实验二十五 RNA干扰实验技术
第三篇 见习实践
**部分 生产工艺流程实地技能考察及训练提纲
第二部分 生物制品市场流通过程考察指导提纲
附 见习报告范文(仅供参考)
附录
一、酸碱指示剂配制和变色范围
二、化学试剂的分级与保管
三、有毒化学药品相关介绍
四、常用层析分离材料