前言 **章 果树基因工程 **节 目的基因分离与克隆 一、TAIL-PCR技术 二、cDNA-AFLP技术 三、开放的差异基因表达技术 四、电子克隆技术 五、基因芯片技术 六、图位克隆技术 七、转座子标签技术 第二节 目的基因转化 一、根癌农杆菌Ti质粒介导的转化系统 二、Ri质粒介导的转化系统 三、体内电穿孔法转基因技术 四、化学物质诱导法 五、基因枪法 六、植物病毒载体介导的转染系统 七、花粉管通道法 八、脂质体法 九、显微注射法 第三节 目的基因检测 一、RT-PCR检测法 二、Southern杂交检测法 三、SDS-PAGE检测法 四、Western印迹检测法 五、EISA检测法 六、双向电泳检测法 七、荧光原位杂交检测法 第四节 果树基因工程的应用及面临的主要问题 一、果树基因工程的应用 二、果树基因工程面临的主要问题 第二章 果树细胞工程 **节 果树细胞培养和次生代谢物的生产 一、果树单细胞培养 二、果树植物愈伤组织的诱导和培养 三、果树体细胞胚的诱导培养 四、果树细胞悬浮培养 五、果树细胞培养生产次生代谢产物 第二节 果树细胞原生质体制备与融合 一、果树原生质体研究概况 二、果树原生质体分离培养技术 三、果树原生质体培养展望 第三节 果树细胞诱变研究与���用 一、果树细胞诱变的种类 二、果树细胞诱变的优势 三、果树细胞诱变的应用 第四节 果树人工种子的研制 一、人工种子的概念、构成和优势 二、人工种子的制备 三、人工种子在果树上的应用 四、果树人工种子存在问题 第五节 果树单倍体的诱发与利用 一、果树单倍体的产生途径 二、果树单倍体的鉴定方法 三、果树单倍体的加倍 四、果树单倍体和加倍单倍体技术在果树育种中的作用 五、果树单倍体和加倍单倍体技术存在的问题及发展趋势 第三章 微生物在果树生产上的应用 **节 微生物肥料在果树生产上的应用 一、微生物肥料在国内外的应用情况 二、微生物肥料的种类 三、微生物肥料的优势 四、果树生产上常用的微生物肥料 五、微生物肥料在果树生产上的应用效果 六、微生物肥料施用方法和注意事项 七、微生物肥料在果树生产上的应用前景与存在的问题 八、微生物肥料在我国的发展趋势 第二节 微生物农药在果树生产上的应用 一、微生物农药的分类 二、微生物农药的优势 三、微生物农药存在的问题 四、微生物农药的发展趋势 五、微生物农药的菌种类群 六、微生物农药的剂型 七、微生物农药的施用方法 八、果树生产上常用的微生物农药 第四章 DNA分子标记技术及其在果树上的应用 **节 DNA分子标记概述 一、遗传标记的发展历史与现状 二、遗传标记与DNA分子标记 三、DNA分子标记的特点 第二节 DNA分子标记技术的类型与种类 一、随机扩增多态性DNA 二、任意引物PCR和DNA扩增指纹 三、限制性片段长度多态性 四、扩增片段长度多态性 五、序列特征化扩增区域标记技术 六、序列标志位点技术 七、简单序列重复标记技术 八、简单重复序列区间标记技术 九、表达序列标签标记技术 十、PCR-单链构象多态性标记技术 十一、抗病基因同源序列多态性标记技术 十二、相关序列扩增多态性标记技术 第三节 DNA分子标记技术在果树上的应用 一、遗传连锁图谱的构建与基因定位 二、构建DNA指纹图谱 三、分子标记辅助选择育种 四、寻找新的基因 五、研究基因表达的差异 六、特殊种质的鉴定 第五章 PCR技术及其在果树上的应用 **节 PCR技术原理、反应体系及反应程序 一、PCR技术原理 二、PCR反应体系 三、PCR反应程序 第二节 PCR技术常见问题与处理 一、PCR扩增参数对扩增目的基因的影响 二、PCR常见问题及处理 第三节 PCR技术的种类 一、RT-PCR 二、一步RT-PCR 三、差异显示PCR 四、限制性显示PCR 五、消减PCR 六、简并PCR 七、免疫PCR 八、PCR-ELISA 九、不对称PCR 十、反向PCR 十一、多重PCR 十二、着色互补PCR 十三、巢式PCR 十四、原位PCR 十五、定量PCR 十六、PCR-Genescan 十七、快速PCR 十八、纳米金辅助PCR 第四节 PCR技术的应用 一、PCR技术用于基因克隆 二、PCR技术用于基因和基因型的鉴定 三、PCR技术用于病原物鉴定 四、PCR技术用于性别鉴定 五、PCR技术用于基因表达 第六章 RNA干扰技术及其应用 **节 RNA干扰的发现 第二节 RNA干扰的机理 第三节 RNA干扰的生物学意义及其应用 一、用于基因功能的研究与分析 二、用于抗病工作的研究 三、用于生长发育的研究与分析 四、问题与展望 第七章 基因编辑技术及其应用 一、基因编辑技术概述 二、CRISPR/Cas系统基本结构特征 三、CRISPR/Cas系统工作机理 四、CRISPR/Cas系统类型 五、CRISPR/Cas系统在植物中的研究与运用 六、CRISPR/Cas系统存在的问题与改进方法 七、CRISPR/Cas系统展望 参考文献