2.梯度凝胶电泳技术(DGGE,TGGE) 这项技术利用DNA分子从双螺旋型变成局部变性型时电泳迁移率会下降的现象。通过实施一些变性条件(添加线性梯度的变性剂或建立变性温度梯度等)改变DNA双螺旋结构,由于序列不同的DNA片段存在部分解链程度不同,不同的结构对DNA在凝胶中迁移速率影响很大,结果不同序列的lDNA片段在凝胶上得以高分辨率地分离,即能把长度相同但核甘酸序列不同的双链DNA片段分开。自从Myuzer首先将DGGE技术应用于微生物分子生态学后,已证明这类电泳(DGGE,TGGE)是揭示自然环境中微生物群落结构的研究、种群动态的分析、富集培养基及分离物的分析、核糖体RNA同源性的分析的有效手段。 3.DNA指纹技术 DNA扩增指纹技术(RAPD)是一种DNA多态性为基础的分子生物学技术。其基本原理是利用含9~10个不同的碱基顺序随机排列的寡核苷酸为随机引物,将所研究的基因组作为模板,进行体外扩增。由于随机引物的多态性,能够产生足够的:DNA多态性,这对于鉴别物种、品种的分类与鉴定、分子遗传标记等提供了有效工具。RAPD技术分析所得到的基因组指纹图谱在比较一段时间内微生物种群的变化,用于探测含有混合微生物种群的各种生物反应器中的微生物多样性上起着重要作用。RAPD同一类技术有RFLP分析、’DFA分析、LFRFA分析、ARDRA分析、An,PP分析等。这些技术应用于生物的遗传多样性、群体遗传、亲缘关系分析、遗传连锁图的构建、特定基因的标记和定位等研究领域。
4.PCR特异性扩增技术
1983年Mullis发明了聚合酶链式反应(PcR)技术。即以一对标定的寡核苷酸片段为引物,在耐热的TaqDNA聚合酶作用下,体外合成特异的DNA片段,将靶序列放大几个数量级。它在微生物生态学中的应用,使得在复杂环境中对那些混合物内低含量的微生物群体成员或微生物种群中某个特异性基因的检测与研究成为可能。PCR技术给整个分子生物学领域带来一次重大的革命,同时衍生出一系列的生物技术。PCR技术与其他技术结合起来使用,如RT-PCR、竞争PCR、槽式PCR、ARDRA等,对被扩增序列做定性或定量研究以分析微生物群体结构。
5.16SrRNA原位杂交法
核酸杂交方法是根据具有同源序列的两条DNA单链或DNA与RNA单链在适当条件下能互补地形成稳定的:DNA双链或DNA-RNA或RNA-RNA链,如果用具有特殊标记的DNA(或RNA)片段作为探针与微生物的同源DNA(或RNA)杂交,然后对含特殊标记的杂交体进行检测,这样就可以对微生物进行定性和定量的研究。 中国白酒历史悠久,在世界酒林中独树一帜,其传统工艺是珍贵的民族遗产。千百年来世代相传,积累了丰富的经验。“泸州老窖”、“水井坊遗址”、“天益老号酒坊”、“江西李渡酒坊遗址”等均先后被列为**级**文物;“泸州老窖、茅台、汾酒传统酿酒技艺”分别被列为**非物质文化遗产;“董酒酿造工艺”被列为“国密”工艺。体现了**对民族遗产的高度重视,倍加保护。近半个世纪以来,**先后组织力量对我国白酒三大基本香型,茅台、汾酒和泸州老窖,进行了系统的查定与总结;大专院校、科研单位和白酒企业,对传统的酿造技艺在继承和发展的基础上,不断创新。
白酒增优降耗,是**的倡导,也是企业的迫切要求。近二十年,白酒工业在科研、生产、实践中,在应用现代技术方面取得了许多实用型的成果,特别是应用现代微生物技术选育出不少新菌株,创造了许多新工艺、新技术、新设备。为方便读者查阅、应用,笔者收集了近十余年见诸报刊、杂志的专业论述,结合自己数十年的科研生产实践,以问答的形式编著成册,希望能在生产中发挥更大的作用。书中对有些技术的应用方法或效果,可能有不同的见解,请读者应用时结合本厂实际灵活运用,切忌生搬硬套。愿书中一些问题对您有所启迪,广开思路,在生产实践中取得效果,则愿足矣!
本书以微生物、制曲、酿酒工艺和清洁生产作为**,对过去笔者出版的专著中论述的tt白酒勾兑”、“新型白酒生产”、“各种香型酒生产工艺”等,不再重复。本书内容充实、文字简练、通俗易懂、实用性强。
本书由**酿酒专家、教授级高工李大和主持,并编写大纲,许多内容亲自撰写、修改、统稿。本书有李国红、李国林、杨红咏、刘念、刘萍、彭奎、潘建军、许绿英参加收集资料、整理、部分编写及打字排版等工作。
本书出版承中国轻工业出版社、酿酒生物技术及应用四川省**实验室、四川省食品发酵工业研究设计院的关心和支持,并参看了同行的许多论著,在此一并致谢。
本书中凡所含成分的含量、浓度等以“%”表示的,一般均指质量分数,酒度(酒精含量)一般指体积分数。
由于水平所限,书中疏漏、错误之处在所难免,恳请读者指正。